1、ELISA的原理：

（1）抗原或抗體能以物理性吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性;

（2）抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;

（3）酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)準(zhǔn)中相應(yīng)抗原或抗體的量成一定比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2、ESISA的類型:

　  （1）雙抗夾心法(測(cè)微生物)：

基本原理：利用連接于固相載體上的抗體和酶標(biāo)抗體分別與樣品中被檢測(cè)抗原分子上兩個(gè)抗原決定簇結(jié)合，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體免疫復(fù)合物，由于反應(yīng)系統(tǒng)中固相抗體和酶標(biāo)抗體的量相對(duì)于待測(cè)抗原是過(guò)量的，因此復(fù)合物的形成量與待測(cè)抗原的含量成正比(在方法可檢測(cè)范圈內(nèi)),測(cè)定復(fù)合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物質(zhì)量(OD值)，即可確定待測(cè)抗原含量。

   （2）間接法測(cè)抗體：

基本原理：將抗原連接到固相載體上，樣品中待測(cè)抗體與之結(jié)合成固相抗原-受檢抗體復(fù)合物，再用酶標(biāo)二抗(針對(duì)案檢抗體的抗體，如羊抗人ICG抗體)與固相免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合，形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二抗復(fù)合物，測(cè)定加底物后的顯色程度，測(cè)定待測(cè)抗體含量。

   （3）競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原(化肥農(nóng)藥)：

 基本原理：首先將特異性抗體吸附于固相載體表面(包被)，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標(biāo)記抗原和被測(cè)抗原的混合液，而另一組只加酶標(biāo)記抗原，標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)會(huì)(標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)含在固相上的酶抗原愈少，最后的顯色也愈淺)，再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色，兩組底物降解量之差，即為我們所要測(cè)定的未知抗原的量。

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